Método de identificação da camada 1.Thin
Tome 0,5g de epimedium ervas medicinais em pó ou uma quantidade adequada de extrato, adicione 10ml de etanol, imergir por 30 minutos, filtrar e evaporar o filtrado. Adicione 1 ml de etanol para dissolver o resíduo, que é a solução de teste. A substância de referência icariina foi pesada, dissolvida em metanol e diluída para 0,1 mg / ml, que era a solução de referência. Pipete 10 μl de cada solução de ensaio e solução de referência, respectivamente, numa placa de sílica H de camada delgada de gel de carboximetilcelulose de sódio, como ligante, com acetato de butilo-formiato de fórmico-água (10: 1: 1 : 1) como agente revelador, desenrolado, retirado, seco ao ar e colocado em uma lâmpada UV (365 nm) para exame. No cromatograma da amostra, a mesma mancha vermelha escura aparece na posição correspondente ao cromatograma da substância de referência; pulverizado com tricloração A solução de teste de alumínio foi reaplicada com uma lâmpada UV (365 nm) para revelar o mesmo ponto fluorescente laranja-avermelhado.
2. Determinação espectrofotométrica de flavonóides totais em Epimedium e seus extratos
O produto de referência icariina foi pesado com precisão e formulado numa solução padrão de 10 ng / ml com metanol. Pesar com precisão a quantidade deste produto em pó (equivalente a cerca de 1mg de icariina), sonicar com metanol 25ml por 30 minutos, diluir para um balão volumétrico de 50ml, filtrar com membrana microporosa de 0,45μm, ou seja testar a solução Produto. A solução de teste e a solução de referência foram tomadas separadamente e a absorvância foi medida a um comprimento de onda de 270 nm com o reagente como branco e o cálculo foi obtido.
3. Determinação da icariina no Epimedium e seu extrato por HPLC
Condições cromatográficas e teste de adequação do sistema: coluna ODS2 5u C18 (4 mm x 150 mm); fase móvel: acetonitrilo-água (30:70); Comprimento de onda de detecção: 270 nm; caudal: 0,8 ml / min. O número de pratos teóricos não é inferior a 1500 com base no icariin.
Prepara�o da solu�o de refer�cia: O produto de refer�cia icariin foi pesado com precis� e foi preparada uma solu�o de 0,1 mg / ml com metanol.
Preparação da solução de teste: pesar com precisão a quantidade adequada deste produto em pó (equivalente a cerca de 1mg de icariina), sonicar com metanol 25ml por 30 minutos, diluir a 50ml balão volumétrico, usar filtro microporoso de 0,45μm Filtração por membrana é a solução de teste.
Método de ensaio: 10 μl de cada solução amostra e solução de referência foram injetados no instrumento HPLC, e a área foi calculada pelo método padrão externo.